7. Sérologie – průkaz specifických protilátek
Obr. 7.1 Vrozená imunita je tvořena fyziologickými bariérami (epitel kůže asliznic) a nespecifickými mechanismyimunity, jako je fagocytóza, komplement, lyzozym, které umožňují rychlou odpověď na infekci, zatímco získaná imunita sestává z B a T buněk s receptory pro různé antigeny, paměťových buněk a cytokinů a je namířena proti určitým antigenům.
Obr. 7.2 Ag po zpracování antigen prezentující buňkou stimuluje B a T buňky přes jejich povrchové receptory. Stimulované T buňky aktivují klonální produkci plazmatických buněk, které syntetizují specifické Ab. Existuje několik tříd Ig (IgG, IgA, IgE, IgM, IgD), IgM se tvoří v časné fázi infekce. Produkce Ab je signifikantně vyšší, pokud se hostitel opakovaně setká s Ag, a to z důvodu existence paměťových buněk.
Obr. 7.3 Schéma latexové aglutinace: Ag (tmavě šedé částice) tvoří po smíchání se specifickými Ab (černé se světlými hypervariabilními regiony) ze séra pacienta komplexy Ag-Ab. V aglutinaci reagují IgM a IgG ze séra pacienta.
Obr. 7.4 Princip metody ELISA.
Obr. 7.5 Schéma provedení Western blotu
Obr. 7.6 Aglutinace pro průkaz specifických Ab proti Treponema pallidum. Želatinové částice jsou adherovány na purifikovaný Ag. Tyto částice aglutinují se specifickou Ab ze séra pacienta (A). Pokud Ab schází, částice sedimentují (B).
Obr. 7.7 Průkaz specifických Ab proti Yersinia enterocolitica (sérotyp 03) hemaglutinací. Erytrocyty jsou adsorbované na purifikovaný Ag. K aglutinaci dochází v přítomnosti specifických protilátek. Séra pacientů (A1, B1, C1) jsou ředěna geometrickou řadou od 1 : 10 (A2, B2, C2). Titr pacienta A je 1 : 160 a pacient C má titr specifických Ab 1 : 20. Sérum pacienta B je negativní.
Obr. 7.8 Reaginový netreponemový test (RPR) pro průkaz infekce Treponema pallidum. Reagin je kardiolipin (difosfatidylglycerol z hovězího endokardu). Pozitivní séra pacientů aglutinují s reaginem adsorbovaným na částice živočišného uhlí.
Obr. 7.9 Western blot (A) – průkaz specifických Ab proti Borrelia burgdorferi v séru pacienta. Pozitivní kontrola (start – šipka) pro Ab; specifické Ab pro Ag p17 and p19 (detail, B).
Obr. 7.10 ELISA pro průkaz IgG proti Mycoplasma pneumoniae v sérech pacientů. Reakce musí obsahovat rovněž pozitivní (A1) a negativní kontroly (B1) a cut off hodnotu (B2). Pozitivní (A2, B3) a negativní vzorky (A3) pacientů.